苜蓿青贮饲料脂肪酸的变化及改善其有氧稳定性的研究
摘要：为提高紫花苜蓿青贮饲料的发酵品质和有氧稳定性，抑制脂肪酸的氧化损失，本试验研究了无添加（对照），添加0.4%茶多酚和0.4%丙酸对紫花苜蓿青贮饲料发酵品质、脂肪酸和有氧稳定性的影响。青贮65天后开窖，取样测定青贮饲料发酵品质和脂肪酸含量。开窖有氧放置144小时后，测定其有氧稳定性和脂肪酸的含量。结果表明，添加丙酸的青贮饲料，pH最低，氨态氮含量最少（P<0.05），粗蛋白、干物质、水溶性碳水化合物含量最高（P<0.05），丙酸抑制有氧细菌的效果最好（P<0.05）。青贮过程中，丙酸抑制脂肪酸降解的效果较好，茶多酚次之；在开窖后有氧放置过程中，茶多酚抑制脂肪酸降解的效果最好，丙酸较差。综上所述，添加丙酸既能提高苜蓿青贮饲料的发酵品质和有氧稳定性，又能抑制青贮过程中脂肪酸的降解，但对抑制开窖后脂肪酸的有氧降解效果不佳。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.2试验设计 2
1.3试验方法 2
1.3.1调制方法2
1.3.2青贮原料化学成分及微生物组成分析2
1.3.3发酵品质、营养品质和微生物组成分析3
1.3.4有氧稳定性分析3
1.3.5脂肪酸含量及组成的测定3
1.4数据处理3
2结果与分析3
2.1青贮前苜蓿的化学和微生物特性3
2.2添加剂对苜蓿青贮饲料发酵品质的影响4
2.3添加剂对苜蓿青贮饲料营养品质的影响4
2.4添加剂对苜蓿青贮饲料中不饱和脂肪酸组成的影响4
2.5有氧放置过程中青贮饲料温度的变化5
2.6有氧放置144 h后青贮饲料pH、有氧细菌和酵母菌数量的变化6
3讨论6
3.1不同添加剂对苜蓿青贮饲料发酵品质的影响6
3.2不同添加剂对苜蓿青贮饲料营养品质的影响6
3.3不同添加剂对苜蓿青贮饲料脂肪酸含量及组成的影响6
3.4不同添加剂对苜蓿青贮饲料有氧稳定性的影响6
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
4.结论6
致谢8
参考文献8
苜蓿青贮饲料脂肪酸的变化及改善其有氧
稳定性的研究
引言
紫花苜蓿是优质豆科饲草，被称为牧草之王。由于紫花苜蓿水分高，含糖量低，缓冲能高，以及附着于苜蓿表面的乳酸菌数量少、产酸能力较弱，苜蓿青贮饲料的发酵品质常常较差，营养损失较大[1]。因此，提高苜蓿青贮饲料的发酵品质、抑制其有氧变质是成功调制苜蓿青贮饲料的关键。
脂肪酸对奶牛健康极为重要，青贮饲料是奶牛日粮的基础饲料，是奶牛主要的脂肪酸来源，饲料中的脂肪酸能够为奶牛提供其自身代谢无法合成的多种脂肪酸，而且还对牛奶中脂肪酸的含量及组成产生影响[2]。研究发现，饲喂青贮饲料的奶牛所产牛奶的不饱和脂肪酸含量显著提高，饱和脂肪酸的含量显著降低，而且牛奶中还出现了对人体极其有益的奇链脂肪酸。随着人们生活质量的不断提高，人们对健康饮食的呼声越来越高，膳食中脂肪酸组成成为了又一个关注热点[3]。目前，人们发现温度、pH和氧气能够影响青贮饲料脂肪酸的降解[4]。如何利用添加剂防止上述因素引起苜蓿青贮饲料脂肪酸的降解成为研究苜蓿青贮饲料脂肪酸的一个重要研究方向。
丙酸作为常用添加剂，能通过促进乳酸菌的生长，抑制好氧性微生物对糖和乳酸的利用，抑制青贮饲料中酵母菌和霉菌的活性，降低青贮饲料中氨态氮/总氮比值，从而提高干物质含量[5]。研究发现，添加丙酸的意大利多花黑麦草青贮饲料的乙酸、丁酸含量及氨态氮/总氮显著低于对照组，残留水溶性碳水化合物含量显著高于对照组，提高了青贮饲料的发酵品质；开窖后有氧暴露过程中，丙酸添加组的酵母和霉菌数量显著低于对照组，温度变化始终没有超出环境温度2℃，有氧稳定性良好[6]。目前，人们对丙酸提高青贮饲料发酵品质和有氧稳定性有较深入的研究，但在厌氧贮藏和有氧暴露过程中研究丙酸对青贮饲料脂肪酸影响的未见报道，值得深入研究。
茶多酚具有抗氧化的作用，能够缓解苜蓿青贮饲料的有氧腐败。有研究显示茶多酚具有良好的抗菌活性，在一定程度上能够抑制霉菌和酵母菌[7]。此外，研究不同抗氧化剂对不饱和脂肪酸含量变化影响的实验结果表明：抗氧化剂的添加均能提高青贮饲料中不饱和脂肪酸的含量，其中茶多酚抗氧化剂的效果较好[8]。由此可见，茶多酚能够在一定程度上有效抑制青贮饲料中脂肪酸的氧化变质，保证饲料中脂肪酸的含量。
本研究旨在探讨添加丙酸和茶多酚对紫花苜蓿青贮饲料发酵品质、脂肪酸和有氧稳定性的影响，以期筛选出能够提高紫花苜蓿青贮饲料的发酵品质和有氧稳定性及抑制脂肪酸降解的添加剂，为优质紫花苜蓿青贮饲料的生产提供理论依据。
1 材料与方法
1．1 试验材料
紫花苜蓿种植于大学草业学院的试验地。该地区处于北亚热带，属亚热带季风气候，年平均温度15.4 ℃，雨量充沛，年平均降水1106 mm。2015年6月15日收割株高为80～100 cm的初花期紫花苜蓿为试验材料。添加剂分别为0.4%茶多酚，0.4%丙酸。
1．2 试验设计
试验设无添加（CK），添加0.4%茶多酚和0.4%丙酸，每个处理3个重复，采用1L的实验室青贮罐， 65天后开窖。
试验方法
1.3.1 调制方法
将新鲜紫花苜蓿切短至1～2 cm后混匀，加入添加剂，混匀后装入1 L实验室青贮罐中，每个青贮罐装820 g，密封好后置于室温下贮藏，65天后开窖，分析青贮发酵品质、营养品质、不饱和脂肪酸以及有氧稳定性。
1.3.2 青贮原料化学成分及微生物组成分析
新鲜紫花苜蓿切短后，采用四分法取300 g样品，烘干后测定干物质（dry matter, DM）。烘干样品粉碎后过1 mm筛，用于测定粗蛋白（crude protein, CP）、水溶性碳水化合物（watersoluble carbohydrate, WSC）、中性洗涤纤维（neutral detergent fiber, NDF）和酸性洗涤纤维（acid detergent fiber, ADF）。测定干物质含量时，将烘箱温度设定为65 ℃，烘烤至恒重；粗蛋白含量采用凯氏定氮法测定；中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维采用尼龙袋法测定；水溶性贪睡化合物含量采用蒽酮硫酸法测定。
另取20 g青贮原料，置于250 mL锥形瓶中，加蒸馏水180 mL稀释10倍，在4 ℃条件下静置18 h后，过滤得到浸提液，用于分析缓冲能。缓冲能采用盐酸、氢氧化钠滴定法测定。乳酸菌、好气性细菌、酵母菌和霉菌数量分别采用MRS（deManRogosaSharpe）、琼脂培养基、营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养计数。乳酸菌厌氧37 ℃培养2 d；好气性细菌、酵母菌和霉菌在有氧条件下30 ℃培养2～3 d。
1.3.3 发酵品质、营养品质和微生物组成分析
青贮罐开封后，采用四分法取35 g混匀的青贮饲料放入聚乙烯塑料封口袋中，加入70 ml蒸馏水，4 ℃浸泡24 h后过滤，用pH计（HANNA, pH 211型）测定浸提液pH值。有机酸和乙醇含量采用高效液相色谱仪测定。色谱条件：安捷伦1260高效液相色谱仪；色谱柱（Carbomix? HNP5，赛分）；流动相为2.5 mmolL1 的硫酸溶液；流速0.7 mlmin1；柱温60℃；检测器，DAD检测器；检测波长210 nm。NH3N含量采用苯酚次氯酸钠比色法测定。营养品质分析、微生物组成分析方法与原料相同。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.2试验设计 2
1.3试验方法 2
1.3.1调制方法2
1.3.2青贮原料化学成分及微生物组成分析2
1.3.3发酵品质、营养品质和微生物组成分析3
1.3.4有氧稳定性分析3
1.3.5脂肪酸含量及组成的测定3
1.4数据处理3
2结果与分析3
2.1青贮前苜蓿的化学和微生物特性3
2.2添加剂对苜蓿青贮饲料发酵品质的影响4
2.3添加剂对苜蓿青贮饲料营养品质的影响4
2.4添加剂对苜蓿青贮饲料中不饱和脂肪酸组成的影响4
2.5有氧放置过程中青贮饲料温度的变化5
2.6有氧放置144 h后青贮饲料pH、有氧细菌和酵母菌数量的变化6
3讨论6
3.1不同添加剂对苜蓿青贮饲料发酵品质的影响6
3.2不同添加剂对苜蓿青贮饲料营养品质的影响6
3.3不同添加剂对苜蓿青贮饲料脂肪酸含量及组成的影响6
3.4不同添加剂对苜蓿青贮饲料有氧稳定性的影响6
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: %3^5`1^9`1^6^0`7^2#
4.结论6
致谢8
参考文献8
苜蓿青贮饲料脂肪酸的变化及改善其有氧
稳定性的研究
引言
紫花苜蓿是优质豆科饲草，被称为牧草之王。由于紫花苜蓿水分高，含糖量低，缓冲能高，以及附着于苜蓿表面的乳酸菌数量少、产酸能力较弱，苜蓿青贮饲料的发酵品质常常较差，营养损失较大[1]。因此，提高苜蓿青贮饲料的发酵品质、抑制其有氧变质是成功调制苜蓿青贮饲料的关键。
脂肪酸对奶牛健康极为重要，青贮饲料是奶牛日粮的基础饲料，是奶牛主要的脂肪酸来源，饲料中的脂肪酸能够为奶牛提供其自身代谢无法合成的多种脂肪酸，而且还对牛奶中脂肪酸的含量及组成产生影响[2]。研究发现，饲喂青贮饲料的奶牛所产牛奶的不饱和脂肪酸含量显著提高，饱和脂肪酸的含量显著降低，而且牛奶中还出现了对人体极其有益的奇链脂肪酸。随着人们生活质量的不断提高，人们对健康饮食的呼声越来越高，膳食中脂肪酸组成成为了又一个关注热点[3]。目前，人们发现温度、pH和氧气能够影响青贮饲料脂肪酸的降解[4]。如何利用添加剂防止上述因素引起苜蓿青贮饲料脂肪酸的降解成为研究苜蓿青贮饲料脂肪酸的一个重要研究方向。
丙酸作为常用添加剂，能通过促进乳酸菌的生长，抑制好氧性微生物对糖和乳酸的利用，抑制青贮饲料中酵母菌和霉菌的活性，降低青贮饲料中氨态氮/总氮比值，从而提高干物质含量[5]。研究发现，添加丙酸的意大利多花黑麦草青贮饲料的乙酸、丁酸含量及氨态氮/总氮显著低于对照组，残留水溶性碳水化合物含量显著高于对照组，提高了青贮饲料的发酵品质；开窖后有氧暴露过程中，丙酸添加组的酵母和霉菌数量显著低于对照组，温度变化始终没有超出环境温度2℃，有氧稳定性良好[6]。目前，人们对丙酸提高青贮饲料发酵品质和有氧稳定性有较深入的研究，但在厌氧贮藏和有氧暴露过程中研究丙酸对青贮饲料脂肪酸影响的未见报道，值得深入研究。
茶多酚具有抗氧化的作用，能够缓解苜蓿青贮饲料的有氧腐败。有研究显示茶多酚具有良好的抗菌活性，在一定程度上能够抑制霉菌和酵母菌[7]。此外，研究不同抗氧化剂对不饱和脂肪酸含量变化影响的实验结果表明：抗氧化剂的添加均能提高青贮饲料中不饱和脂肪酸的含量，其中茶多酚抗氧化剂的效果较好[8]。由此可见，茶多酚能够在一定程度上有效抑制青贮饲料中脂肪酸的氧化变质，保证饲料中脂肪酸的含量。
本研究旨在探讨添加丙酸和茶多酚对紫花苜蓿青贮饲料发酵品质、脂肪酸和有氧稳定性的影响，以期筛选出能够提高紫花苜蓿青贮饲料的发酵品质和有氧稳定性及抑制脂肪酸降解的添加剂，为优质紫花苜蓿青贮饲料的生产提供理论依据。
1 材料与方法
1．1 试验材料
紫花苜蓿种植于大学草业学院的试验地。该地区处于北亚热带，属亚热带季风气候，年平均温度15.4 ℃，雨量充沛，年平均降水1106 mm。2015年6月15日收割株高为80～100 cm的初花期紫花苜蓿为试验材料。添加剂分别为0.4%茶多酚，0.4%丙酸。
1．2 试验设计
试验设无添加（CK），添加0.4%茶多酚和0.4%丙酸，每个处理3个重复，采用1L的实验室青贮罐， 65天后开窖。
试验方法
1.3.1 调制方法
将新鲜紫花苜蓿切短至1～2 cm后混匀，加入添加剂，混匀后装入1 L实验室青贮罐中，每个青贮罐装820 g，密封好后置于室温下贮藏，65天后开窖，分析青贮发酵品质、营养品质、不饱和脂肪酸以及有氧稳定性。
1.3.2 青贮原料化学成分及微生物组成分析
新鲜紫花苜蓿切短后，采用四分法取300 g样品，烘干后测定干物质（dry matter, DM）。烘干样品粉碎后过1 mm筛，用于测定粗蛋白（crude protein, CP）、水溶性碳水化合物（watersoluble carbohydrate, WSC）、中性洗涤纤维（neutral detergent fiber, NDF）和酸性洗涤纤维（acid detergent fiber, ADF）。测定干物质含量时，将烘箱温度设定为65 ℃，烘烤至恒重；粗蛋白含量采用凯氏定氮法测定；中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维采用尼龙袋法测定；水溶性贪睡化合物含量采用蒽酮硫酸法测定。
另取20 g青贮原料，置于250 mL锥形瓶中，加蒸馏水180 mL稀释10倍，在4 ℃条件下静置18 h后，过滤得到浸提液，用于分析缓冲能。缓冲能采用盐酸、氢氧化钠滴定法测定。乳酸菌、好气性细菌、酵母菌和霉菌数量分别采用MRS（deManRogosaSharpe）、琼脂培养基、营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养计数。乳酸菌厌氧37 ℃培养2 d；好气性细菌、酵母菌和霉菌在有氧条件下30 ℃培养2～3 d。
1.3.3 发酵品质、营养品质和微生物组成分析
青贮罐开封后，采用四分法取35 g混匀的青贮饲料放入聚乙烯塑料封口袋中，加入70 ml蒸馏水，4 ℃浸泡24 h后过滤，用pH计（HANNA, pH 211型）测定浸提液pH值。有机酸和乙醇含量采用高效液相色谱仪测定。色谱条件：安捷伦1260高效液相色谱仪；色谱柱（Carbomix? HNP5，赛分）；流动相为2.5 mmolL1 的硫酸溶液；流速0.7 mlmin1；柱温60℃；检测器，DAD检测器；检测波长210 nm。NH3N含量采用苯酚次氯酸钠比色法测定。营养品质分析、微生物组成分析方法与原料相同。
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