不同品种红三叶的生长适应性及叶蛋白生产技术研究
摘要：本研究以春茵、巴东、阿尔维斯三个品种红三叶为实验材料，在南京地区进行种植并对这3个品种生长适应性进行了比较分析；从影响叶蛋白提取的料液比、提取时间和提取温度3个主要因素研究对其叶蛋白提取率的影响，通过正交试验对叶蛋白提取工艺进行了优化；从加热温度和加热时间两个方面研究了直接加热法对叶蛋白絮凝分离的影响。结果表明，春茵更适宜在南京进行种植品种，红三叶蛋白质提取的最佳工艺条件为：料液比为1：24，浸提温度为25℃ ，浸提时间为40min，其最大提取率为81.64μg·ml-1。红三叶的最佳絮凝时间为15min，絮凝温度80℃。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Keywords1
引言2
1材料与方法 2
1.1试验地概况 2
1.2试验材料 2
1.3试验设计与方法 2
1.4数据处理 3
2结果与分析 3
2.1红三叶适应性分析3
2.1.1 不同品种三叶草株高比较3
2.1.2不同品种红三叶鲜重、干重及水分含量比较4
2.1.3不同品种红三叶成长速率及产量比较4
2.2红三叶LPC提取的单因素试验5
2.2.1料水比对红三叶LPC提取率的影响5
2.2.2浸提时间对红三叶LPC提取率的影响5
2.2.3浸提温度对红三叶LPC浸提率的影响6
2.2.4 红三叶叶蛋白提取工艺最佳参数的确定6
2.3 红三叶叶蛋白絮凝分离最佳参数的确定6
3讨论与结论7
致谢9
参考文献9
不同品种红三叶的生长适应性及叶蛋白生产技术研究
引言
随着人们生活水平的提高，人们对畜产品的需求量增加，饲料供应不足的问题日趋严重，特别是蛋白质饲料短缺是长期制约我国乃至世界畜牧业发展的瓶颈。近几年，我国大豆进口数量已经达我国总大豆需求量的80%。缓解蛋白质饲料不足、减轻我国对大豆进口的依赖现状具有重要的生产及战略意义。
红三叶草具有适口性好、产量高、营养价值高、固氮
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
能力强等特点，在南京地区草场中可以进行大面积种植及规模化的生产，在一定程度上为南京地区畜牧业提供了优质牧草，红三叶今后也必然会发展为优势牧草。通过测量株高、测定含水量对这三个品种生长适应性进行比较分析。在做好红三叶草的品种研究，引入适合南京地区种植的优良品种，必然能为南京地区畜牧业的发展提供了有依据的科学保障。
叶蛋白是指刈割新鲜的、有利用价值的饲草或其他植物的地上部分（嫩叶或嫩茎叶）经压榨后，通过汁液提取、蛋白凝聚与分离干燥得到的蛋白质浓缩物（Leaf Protein Concentrates），简称为叶蛋白（LPC）[2]。LCP是功能性蛋白质[3]，营养价值高、食用效果好，具有极大开发价值[4]。据分析，其蛋白质含量一般为45%~65%，富含18种氨基酸、叶黄素以及多糖[5]。还含有胡萝卜素、碳水化合物、矿物质、维生素E、维生素C，B族维生素及促生长发育的未知因子等，氨基酸组分配比合理。LCP是猪、鸡、牛、羊的蛋白质补充饲料。大量实验研究证实，用叶蛋白饲料取代猪、家禽日粮中的部分乃至全部的蛋白质来源，或取代哺乳动物犊牛的部分全乳代用品时，都能取得良好的饲养效果[6]。
本试验对叶蛋白生产过程中影响叶蛋白提取的几个主要因素（料液比、提取时间、提取温度）进行单因素试验和正交试验，根据试验结果筛选出叶蛋白提取工艺的最佳参数。同时针对絮凝温度、絮凝时间对蛋白质进行研究，以期为日后的实验工作提供可靠的理论依据。
1材料与方法
1.1 试验地概况
试验于大学牌楼试验基地进行。试验地位于北纬32°33′，东经118°27′，年平均气温15.4℃，绝对最高温度43℃，绝对最低温度14℃，最热月平均温度28.1℃，最冷月平均温度2.1℃，年均降水量1106mm，无霜期237d。
1.2试验材料
收集了3个不同品种（巴东、春茵、阿尔维斯）的红三叶草种。
1.3试验设计与方法
1.3.1红三叶生长适应性观察
（1）红三叶种植
于2015年10月5日播种，小区面积3×4㎡ ，每个品种进行3次重复播种，并进行灌溉、杂草防除和病虫害等常规田间管理。
（2）测定指标（株高、水分含量、单位面积产量、生长速率)。
1.3.2叶蛋白提取工艺优化
（1） LPC浸提液制备
红三叶：称取新鲜红三叶2g，按照不同的料水比加入一定量的蒸馏水，打浆 2min后浸提一定时间，用4层纱布过滤，滤液在10000r/min下离心5min得到上清液，即LPC浸提液，测定浸提液中蛋白质含量，计算LPC提取率。
（2）单因素试验
在LPC浸提液制备过程中分别以不同的料水比（1：8，1：12，1：16，1：20，1：24，1：28），浸提时间（0min，10min，20min，30min，40min，50min），浸提温度（20℃，30℃，40℃，50℃，60℃）进行单因素浸提实验，通过测定浸提液中蛋白质含量确定各处理的LPC提取率。
（3）正交试验
根据单因素试验结果，选取料水比、浸提时间、浸提温度3因素3水平（表1）进行正交试验，筛选最佳红三叶提取条件。
水平
A料水比
B浸提温度/℃
C浸提时间/min
1
1:20
20
5
2
1:24
30
10
3
1:28
40
15
表1 红三叶正交试验因子水平
（4）蛋白质含量测定
利用考马斯亮蓝法来测定蛋白质的含量。
（5）LPC提取率的计算
LPC提取率=蛋白质含量（g/mL）×浸提液体积（mL）/牧草（红三叶）鲜重（g）
1.3.3蛋白质絮凝分离的优化
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Keywords1
引言2
1材料与方法 2
1.1试验地概况 2
1.2试验材料 2
1.3试验设计与方法 2
1.4数据处理 3
2结果与分析 3
2.1红三叶适应性分析3
2.1.1 不同品种三叶草株高比较3
2.1.2不同品种红三叶鲜重、干重及水分含量比较4
2.1.3不同品种红三叶成长速率及产量比较4
2.2红三叶LPC提取的单因素试验5
2.2.1料水比对红三叶LPC提取率的影响5
2.2.2浸提时间对红三叶LPC提取率的影响5
2.2.3浸提温度对红三叶LPC浸提率的影响6
2.2.4 红三叶叶蛋白提取工艺最佳参数的确定6
2.3 红三叶叶蛋白絮凝分离最佳参数的确定6
3讨论与结论7
致谢9
参考文献9
不同品种红三叶的生长适应性及叶蛋白生产技术研究
引言
随着人们生活水平的提高，人们对畜产品的需求量增加，饲料供应不足的问题日趋严重，特别是蛋白质饲料短缺是长期制约我国乃至世界畜牧业发展的瓶颈。近几年，我国大豆进口数量已经达我国总大豆需求量的80%。缓解蛋白质饲料不足、减轻我国对大豆进口的依赖现状具有重要的生产及战略意义。
红三叶草具有适口性好、产量高、营养价值高、固氮
*好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072*
能力强等特点，在南京地区草场中可以进行大面积种植及规模化的生产，在一定程度上为南京地区畜牧业提供了优质牧草，红三叶今后也必然会发展为优势牧草。通过测量株高、测定含水量对这三个品种生长适应性进行比较分析。在做好红三叶草的品种研究，引入适合南京地区种植的优良品种，必然能为南京地区畜牧业的发展提供了有依据的科学保障。
叶蛋白是指刈割新鲜的、有利用价值的饲草或其他植物的地上部分（嫩叶或嫩茎叶）经压榨后，通过汁液提取、蛋白凝聚与分离干燥得到的蛋白质浓缩物（Leaf Protein Concentrates），简称为叶蛋白（LPC）[2]。LCP是功能性蛋白质[3]，营养价值高、食用效果好，具有极大开发价值[4]。据分析，其蛋白质含量一般为45%~65%，富含18种氨基酸、叶黄素以及多糖[5]。还含有胡萝卜素、碳水化合物、矿物质、维生素E、维生素C，B族维生素及促生长发育的未知因子等，氨基酸组分配比合理。LCP是猪、鸡、牛、羊的蛋白质补充饲料。大量实验研究证实，用叶蛋白饲料取代猪、家禽日粮中的部分乃至全部的蛋白质来源，或取代哺乳动物犊牛的部分全乳代用品时，都能取得良好的饲养效果[6]。
本试验对叶蛋白生产过程中影响叶蛋白提取的几个主要因素（料液比、提取时间、提取温度）进行单因素试验和正交试验，根据试验结果筛选出叶蛋白提取工艺的最佳参数。同时针对絮凝温度、絮凝时间对蛋白质进行研究，以期为日后的实验工作提供可靠的理论依据。
1材料与方法
1.1 试验地概况
试验于大学牌楼试验基地进行。试验地位于北纬32°33′，东经118°27′，年平均气温15.4℃，绝对最高温度43℃，绝对最低温度14℃，最热月平均温度28.1℃，最冷月平均温度2.1℃，年均降水量1106mm，无霜期237d。
1.2试验材料
收集了3个不同品种（巴东、春茵、阿尔维斯）的红三叶草种。
1.3试验设计与方法
1.3.1红三叶生长适应性观察
（1）红三叶种植
于2015年10月5日播种，小区面积3×4㎡ ，每个品种进行3次重复播种，并进行灌溉、杂草防除和病虫害等常规田间管理。
（2）测定指标（株高、水分含量、单位面积产量、生长速率)。
1.3.2叶蛋白提取工艺优化
（1） LPC浸提液制备
红三叶：称取新鲜红三叶2g，按照不同的料水比加入一定量的蒸馏水，打浆 2min后浸提一定时间，用4层纱布过滤，滤液在10000r/min下离心5min得到上清液，即LPC浸提液，测定浸提液中蛋白质含量，计算LPC提取率。
（2）单因素试验
在LPC浸提液制备过程中分别以不同的料水比（1：8，1：12，1：16，1：20，1：24，1：28），浸提时间（0min，10min，20min，30min，40min，50min），浸提温度（20℃，30℃，40℃，50℃，60℃）进行单因素浸提实验，通过测定浸提液中蛋白质含量确定各处理的LPC提取率。
（3）正交试验
根据单因素试验结果，选取料水比、浸提时间、浸提温度3因素3水平（表1）进行正交试验，筛选最佳红三叶提取条件。
水平
A料水比
B浸提温度/℃
C浸提时间/min
1
1:20
20
5
2
1:24
30
10
3
1:28
40
15
表1 红三叶正交试验因子水平
（4）蛋白质含量测定
利用考马斯亮蓝法来测定蛋白质的含量。
（5）LPC提取率的计算
LPC提取率=蛋白质含量（g/mL）×浸提液体积（mL）/牧草（红三叶）鲜重（g）
1.3.3蛋白质絮凝分离的优化
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