添加剂对燕麦青贮饲料有氧稳定性的影响
本文研究了植物乳杆菌、食用油、糖蜜、茶多酚和丙酸等添加剂对燕麦青贮饲料发酵品质和有氧稳定性的影响。将新鲜燕麦切短后，混合均匀，按试验设计分别进行添加剂处理后压实装入实验室青贮罐中，青贮65天开窖后，评价燕麦青贮饲料发酵品质，并用温度检测法分析燕麦青贮有氧稳定性。研究结果表明，糖蜜和茶多酚、以及二者的组合添加组的乙酸含量显著（P<0.05）高于对照组、植物乳杆菌组、食用油组和丙酸组；丙酸组和植物乳杆菌组pH值显著（P<0.05）低于对照组；糖蜜和茶多酚组合添加组在48 h未超过室温2℃，酵母菌、霉菌数量最低，pH值、有氧细菌数量也比对照组低。综上所述，组合添加糖蜜和茶多酚提高燕麦有氧稳定性的效果最好。
目录
摘要 3
引言
燕麦属于一年生草本植物，其具有耐盐碱、抗旱耐寒冷、产量高以及其他一些特点[1]，在我国广泛栽种，遍布各山区高原和北部高寒冷凉地区[2]，燕麦质地松软，具有良好的物理结构，在制备青贮饲料时容易压实，并且燕麦秸秆的可消化纤维含量高，饲喂价值高于水稻、小麦等秸秆。燕麦本身单糖含量较高，用来制作青贮较易获得优良品质的饲料 [3]，将其用于生产青贮饲料，在质地、以及牛羊采食口感等方面优于小麦、水稻等作物秸秆，在冬春季节缺料时饲喂家畜效果较好。青贮饲料的营养品质不仅取决于原料营养成分的好坏，与调制技术也密不可分。即使用相同的原料，不同收割期其营养组分相差也很大。
在生产实践中，由于破坏和密封不严或者是在填装青贮原料时没有压实和装匀，使青贮饲料不能在厌氧环境中储藏，经常造成青贮饲料腐烂，即青贮饲料的二次发酵[4]。在贮存或者使用过程中，当青贮饲料渗入空气后，霉菌、酵母菌和好氧性细菌生长繁衍，青贮饲料的温度和pH值也会随之升高[5]，在很大程度上影响了青贮的发酵方式、各种菌的计数和有氧稳定性，一些主要的发酵酸和蛋白质等物质会损失掉，产生水和氨，有的青贮饲料迅速腐败变质[6]；青贮饲料的营养质量下降，影响牲畜的采食量及消化性[7]。因此，控制牧草在青贮发酵过程中和开封饲喂牲畜以及长时间储藏的无氧环境，对提高青贮饲料的有氧稳定性非常重要。有氧稳定性程度也是评价青贮饲料品质的一个重要指标。
在制备青贮饲料时经常用到添加剂，目的在于弥补青贮原料在其发酵基质、干物质含量、缓冲能和原料本身结构的不 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
足，用来提高青贮饲料的保鲜程度。同质型发酵乳酸菌与其他发酵产品相比，能快速降低pH值，但有分析表明，玉米、高粱和甘蔗的青贮与未处理的原料相比并没有降低[8]。实验中用的植物乳杆菌就属于这类菌。丙酸和乙酸能有效抑制某些菌类的生长繁衍来提高青贮饲料的有氧稳定性，是一种常用的好氧性变质抑制剂。糖蜜是制糖产业的副产品，当原料的水溶性碳水化合物含量较低时，添加富含糖分的添加剂促进乳酸发酵，快速降低青贮饲料的pH值，可明显改善发酵品质，是常用的营养添加剂。茶多酚具有很强的抗氧化能力，近年来在食品保鲜、医用保健品、畜牧业等方面应用增多。食用油用于添加剂具有取材方便成本低等特点。决定青贮饲料品质的不只是原材料的选择与制备过程中的规范操作和合理保存有关，其发酵品质与添加剂种类的选择也息息相关。青贮的添加剂根据其特定的作用方式以不同的方式影响发酵模式和有氧稳定性[9]。选择合适的添加剂是制备优良饲料的关键。
本研究分析添加剂对燕麦青贮饲料发酵品质和有氧稳定性的影响，以挑选出能够有效提高燕麦青贮饲料发酵品质以及有氧稳定性的添加剂，为燕麦青贮饲料的生产实践提供合理依据。
1 材料与方法
1．1 试验材料
2017年5月10日收割适宜生长期的燕麦为试验材料。所用添加剂为植物乳杆菌、糖蜜、食用油、丙酸、茶多酚。
1．2 试验设计
试验设计：对照，添加植物乳杆菌1*105cfu/g，糖蜜0.4%，食用油1%，丙酸0.4%，茶多酚0.4%。
1．3 试验方法
1．3．1 青贮饲料的调制 将收割的新鲜燕麦秸秆晾晒使其含水量到一定值再切短至1～2 cm，混合均匀，按试验设计安排分别进行不同的添加剂处理。将添加剂处理后的燕麦材料压实装入已经标记好的实验室青贮罐中，是容量为1 L的塑料瓶，装好青贮材料后，盖紧内盖和外瓶盖，然后用胶带将瓶盖部分密封，在室温下保存60天。
1．3．2 材料组分及微生物分析 青贮原料的缓冲能用盐酸、氢氧化钠滴定法测定[12]。用定氮仪测定青贮饲料的粗蛋白含量 [10]。可溶性碳水化合物(watersoluble carbohydrates, WSC)含量采用蒽酮硫酸法测定[11]。干物质含量用70℃干燥法来测定,粗蛋白含量用凯氏定氮法来测定[13]。中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维采用尼龙袋法测定法测定[10]。好氧性细菌的数量使用MRS琼脂培养基，乳酸菌的数量用营养琼脂培养基计数，酵母菌和霉菌的数量则用马铃薯葡萄糖琼脂培养基计数[12]。培养条件和时间分别是乳酸菌在厌氧条件下37 ℃培养2 d，其余两者都在有氧条件下 30 ℃培养23 d[13]。
1．3．3 燕麦青贮饲料的发酵品质和微生物组成分析 在青贮一定时间后，取出青贮饲料首先将饲料样品充分混合均匀，取35 g青贮饲料样品放入锥形瓶中，再加入75ml蒸馏水，用封口膜将瓶口密封，放进4 ℃冰箱中浸泡 24 h取出过滤，保留浸提液用，pH计（HANNA, pH 211型）测定浸提液 pH 值[14]。剩余青贮饲料装入塑料瓶中，不压实，自然状态装入。有机酸和乙醇的含量用液相色谱仪测定[11]，色谱条件：安捷伦1260高效液相色谱仪；色谱柱（Carbomix? HNP5，赛分）；流动相为2.5 mmol L1 的硫酸溶液；流速0.7 mlmin1；柱温60℃；检测器，DAD检测器；检测波长210 nm。NH3N含量采用苯酚次氯酸钠比色法测定[15]。发酵后青贮饲料的微生物组成分析方法与原料微生物分析方法相同。
1．3．4 燕麦青贮饲料的有氧稳定性分析 使用无压紧自然状态装进塑料瓶的青贮饲料分析燕麦青贮饲料的有氧稳定性。试验中，将桶口用双层纱布包裹[15]，使青贮饲料样品完全暴露于空气中，而且能防止果蝇等其他杂质污染，同时减少青贮饲料样品水分的散失，在置于室温(24～27℃)条件下保存。用多通道温度记录仪(MDL—1048A高精度温度记录仪，上海天贺自动化仪表有限公司)测定饲料样品的温度，使用时将温度记录仪的探头分别放入每个装有饲料样品的瓶子中，使每各金属探头深入样品中。同时分出3个探头放置在瓶子外，用来测定环境温度。每隔一定时间测定一次温度。如果测出来某样品的温度比测得的环境温度高2℃，说明该青贮饲料已经开始腐败 [17]。
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引言
燕麦属于一年生草本植物，其具有耐盐碱、抗旱耐寒冷、产量高以及其他一些特点[1]，在我国广泛栽种，遍布各山区高原和北部高寒冷凉地区[2]，燕麦质地松软，具有良好的物理结构，在制备青贮饲料时容易压实，并且燕麦秸秆的可消化纤维含量高，饲喂价值高于水稻、小麦等秸秆。燕麦本身单糖含量较高，用来制作青贮较易获得优良品质的饲料 [3]，将其用于生产青贮饲料，在质地、以及牛羊采食口感等方面优于小麦、水稻等作物秸秆，在冬春季节缺料时饲喂家畜效果较好。青贮饲料的营养品质不仅取决于原料营养成分的好坏，与调制技术也密不可分。即使用相同的原料，不同收割期其营养组分相差也很大。
在生产实践中，由于破坏和密封不严或者是在填装青贮原料时没有压实和装匀，使青贮饲料不能在厌氧环境中储藏，经常造成青贮饲料腐烂，即青贮饲料的二次发酵[4]。在贮存或者使用过程中，当青贮饲料渗入空气后，霉菌、酵母菌和好氧性细菌生长繁衍，青贮饲料的温度和pH值也会随之升高[5]，在很大程度上影响了青贮的发酵方式、各种菌的计数和有氧稳定性，一些主要的发酵酸和蛋白质等物质会损失掉，产生水和氨，有的青贮饲料迅速腐败变质[6]；青贮饲料的营养质量下降，影响牲畜的采食量及消化性[7]。因此，控制牧草在青贮发酵过程中和开封饲喂牲畜以及长时间储藏的无氧环境，对提高青贮饲料的有氧稳定性非常重要。有氧稳定性程度也是评价青贮饲料品质的一个重要指标。
在制备青贮饲料时经常用到添加剂，目的在于弥补青贮原料在其发酵基质、干物质含量、缓冲能和原料本身结构的不 *好棒文|www.hbsrm.com +Q: ^351916072^
足，用来提高青贮饲料的保鲜程度。同质型发酵乳酸菌与其他发酵产品相比，能快速降低pH值，但有分析表明，玉米、高粱和甘蔗的青贮与未处理的原料相比并没有降低[8]。实验中用的植物乳杆菌就属于这类菌。丙酸和乙酸能有效抑制某些菌类的生长繁衍来提高青贮饲料的有氧稳定性，是一种常用的好氧性变质抑制剂。糖蜜是制糖产业的副产品，当原料的水溶性碳水化合物含量较低时，添加富含糖分的添加剂促进乳酸发酵，快速降低青贮饲料的pH值，可明显改善发酵品质，是常用的营养添加剂。茶多酚具有很强的抗氧化能力，近年来在食品保鲜、医用保健品、畜牧业等方面应用增多。食用油用于添加剂具有取材方便成本低等特点。决定青贮饲料品质的不只是原材料的选择与制备过程中的规范操作和合理保存有关，其发酵品质与添加剂种类的选择也息息相关。青贮的添加剂根据其特定的作用方式以不同的方式影响发酵模式和有氧稳定性[9]。选择合适的添加剂是制备优良饲料的关键。
本研究分析添加剂对燕麦青贮饲料发酵品质和有氧稳定性的影响，以挑选出能够有效提高燕麦青贮饲料发酵品质以及有氧稳定性的添加剂，为燕麦青贮饲料的生产实践提供合理依据。
1 材料与方法
1．1 试验材料
2017年5月10日收割适宜生长期的燕麦为试验材料。所用添加剂为植物乳杆菌、糖蜜、食用油、丙酸、茶多酚。
1．2 试验设计
试验设计：对照，添加植物乳杆菌1*105cfu/g，糖蜜0.4%，食用油1%，丙酸0.4%，茶多酚0.4%。
1．3 试验方法
1．3．1 青贮饲料的调制 将收割的新鲜燕麦秸秆晾晒使其含水量到一定值再切短至1～2 cm，混合均匀，按试验设计安排分别进行不同的添加剂处理。将添加剂处理后的燕麦材料压实装入已经标记好的实验室青贮罐中，是容量为1 L的塑料瓶，装好青贮材料后，盖紧内盖和外瓶盖，然后用胶带将瓶盖部分密封，在室温下保存60天。
1．3．2 材料组分及微生物分析 青贮原料的缓冲能用盐酸、氢氧化钠滴定法测定[12]。用定氮仪测定青贮饲料的粗蛋白含量 [10]。可溶性碳水化合物(watersoluble carbohydrates, WSC)含量采用蒽酮硫酸法测定[11]。干物质含量用70℃干燥法来测定,粗蛋白含量用凯氏定氮法来测定[13]。中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维采用尼龙袋法测定法测定[10]。好氧性细菌的数量使用MRS琼脂培养基，乳酸菌的数量用营养琼脂培养基计数，酵母菌和霉菌的数量则用马铃薯葡萄糖琼脂培养基计数[12]。培养条件和时间分别是乳酸菌在厌氧条件下37 ℃培养2 d，其余两者都在有氧条件下 30 ℃培养23 d[13]。
1．3．3 燕麦青贮饲料的发酵品质和微生物组成分析 在青贮一定时间后，取出青贮饲料首先将饲料样品充分混合均匀，取35 g青贮饲料样品放入锥形瓶中，再加入75ml蒸馏水，用封口膜将瓶口密封，放进4 ℃冰箱中浸泡 24 h取出过滤，保留浸提液用，pH计（HANNA, pH 211型）测定浸提液 pH 值[14]。剩余青贮饲料装入塑料瓶中，不压实，自然状态装入。有机酸和乙醇的含量用液相色谱仪测定[11]，色谱条件：安捷伦1260高效液相色谱仪；色谱柱（Carbomix? HNP5，赛分）；流动相为2.5 mmol L1 的硫酸溶液；流速0.7 mlmin1；柱温60℃；检测器，DAD检测器；检测波长210 nm。NH3N含量采用苯酚次氯酸钠比色法测定[15]。发酵后青贮饲料的微生物组成分析方法与原料微生物分析方法相同。
1．3．4 燕麦青贮饲料的有氧稳定性分析 使用无压紧自然状态装进塑料瓶的青贮饲料分析燕麦青贮饲料的有氧稳定性。试验中，将桶口用双层纱布包裹[15]，使青贮饲料样品完全暴露于空气中，而且能防止果蝇等其他杂质污染，同时减少青贮饲料样品水分的散失，在置于室温(24～27℃)条件下保存。用多通道温度记录仪(MDL—1048A高精度温度记录仪，上海天贺自动化仪表有限公司)测定饲料样品的温度，使用时将温度记录仪的探头分别放入每个装有饲料样品的瓶子中，使每各金属探头深入样品中。同时分出3个探头放置在瓶子外，用来测定环境温度。每隔一定时间测定一次温度。如果测出来某样品的温度比测得的环境温度高2℃，说明该青贮饲料已经开始腐败 [17]。
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