利用酵母双杂交体系筛选海滨雀稗snrk2.4互作因子
目前,重金属镉污染严重影响人们的日常生活,治理土壤镉污染已刻不容缓。可利植物修复来治理该问题。在植物修复中常用草坪草作为修复工具,作为暖季型草坪草中具有极强耐镉性的海滨雀稗(Paspalum vaginatum),是作为污染修复的优良选择。据研究发现,拟南芥SnRK2家族I类成员具有耐镉负调控机制,在实验前期发现海滨雀稗SnRK2家族I类成员也具备该功能。本研究选取海滨雀稗SnRK2家族I类成员PvSnRK2.4,通过酵母双杂交筛选方法鉴定其互作蛋白,为探究其耐镉分子机制奠定基础。
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key words 2
1 草坪草耐镉研究的重要意义 2
1.1 重金属镉污染的危害 2
1.2 治理镉污染草坪草品种选择 3
2 国内外SnRK2家族成员研究现状 3
2.1 蔗糖非酵解型蛋白激酶的组成 3
2.2 SnRK2家族成员的功能 3
3 酵母双杂交系统 4
正文 5
1 材料与方法 5
1.1 实验菌种和质粒 5
1.2 主要实验仪器 5
1.3 实验试剂合溶液配制 5
1.4 实验方法 6
2 结果与分析 9
2.1 海滨雀稗SnRK 2.4基因克隆结果 9
2.2 BamHI和EcoRI双酶切电泳结果和构建中间载体 10
2.3 构建酵母双杂pDEST32 PvSnRK2.4(BD)载体 10
2.4 pDEST32PvSnRK 2.4自激活检验 11
2.5 共转化、酵母单克隆筛选及验证 11
2.6 酵母质粒的提取、PCR检测及序列分析 12
2.7 基因测序结果 13
3 讨论 13
致谢 14
参考文献 15
利用酵母双杂交体系筛选海滨雀稗SnRK2.4互作因子
目录
摘要 2
关键词 2
Abstract 2
Key words 2
1 草坪草耐镉研究的重要意义 2
1.1 重金属镉污染的危害 2
1.2 治理镉污染草坪草品种选择 3
2 国内外SnRK2家族成员研究现状 3
2.1 蔗糖非酵解型蛋白激酶的组成 3
2.2 SnRK2家族成员的功能 3
3 酵母双杂交系统 4
正文 5
1 材料与方法 5
1.1 实验菌种和质粒 5
1.2 主要实验仪器 5
1.3 实验试剂合溶液配制 5
1.4 实验方法 6
2 结果与分析 9
2.1 海滨雀稗SnRK 2.4基因克隆结果 9
2.2 BamHI和EcoRI双酶切电泳结果和构建中间载体 10
2.3 构建酵母双杂pDEST32 PvSnRK2.4(BD)载体 10
2.4 pDEST32PvSnRK 2.4自激活检验 11
2.5 共转化、酵母单克隆筛选及验证 11
2.6 酵母质粒的提取、PCR检测及序列分析 12
2.7 基因测序结果 13
3 讨论 13
致谢 14
参考文献 15
利用酵母双杂交体系筛选海滨雀稗SnRK2.4互作因子
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